将培养18~24小时的新鲜斜面培养物用PBS洗下,利用比浊法稀释至所需使用的浓度,4℃备用。
经测量,10-100微升的微量移液器枪头,其孔径与牛津杯内径尺寸几乎一致,因此选用该型号枪头用于培养基打孔。打孔时注意一次打孔,不可转动枪头,防止平板琼脂出现裂缝,对结果造成影响,打完孔用无菌针头将琼脂孔中的培养基挑出,每次用针头后要用酒精灯火焰灼烧灭菌。每个平板均匀打5个孔,4个孔加待测样品,中间1个孔加对照样品。
向融化并冷至40℃-45℃的培养基中接入试验菌悬液(1%),混匀,使培养基含菌浓度为5105 CFU/mL~5106 CFU/mL,倾注到平皿内,每皿约15mL-20 mL,转动平皿,使菌液与培养基混匀,静置凝固。
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