经测量,10-100微升的微量移液器枪头,其孔径与牛津杯内径尺寸几乎一致,因此选用该型号枪头用于培养基打孔。打孔时注意一次打孔,不可转动枪头,防止平板琼脂出现裂缝,对结果造成影响,打完孔用无菌针头将琼脂孔中的培养基挑出,每次用针头后要用酒精灯火焰灼烧灭菌。每个平板均匀打5个孔,4个孔加待测样品,中间1个孔加对照样品。
抑菌环法是利用抑菌剂不断溶解经琼脂平板扩散,使其周围的细菌、真菌生长受到抑制而形成抑菌环,通过测量抑菌环大小来判断该产品是否具有抑菌能力。
牛津杯法,是《中国药典》2015年版抗生素残留量检查法,按照此方法进行药膏、牙膏等粘稠产品的抑菌环测试,获得的抑菌环形状较理想、重复性较好。操作中要特别注意,在培养基上放置牛津杯时,用无菌镊子轻轻加压,使杯底与培养基表面接触无空隙,并且在加样过程中,由于该类样品粘稠流动性较差,需确保牛津杯内样品加实、无孔洞,加入样品与培养基表面完全接触无空隙,这样才能得出数据准确且高质量的抑菌环。在培养皿转移到培养箱的过程中,还要注意轻拿轻放,避免牛津杯位置移动甚至倒翻,令试验前功尽弃。
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