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WB实验有哪些注意事项?
  • BCA法测定蛋白浓度受温度和时间的影响较大,吸光度值会随着时间的延长或温度升高而变化,如果不能精que控制显色反应的时间和温度,建议每次测定都需要做标准曲线。

  • 在进行蛋白标准贮备液的配制时,需确保溶解充分。稀释配制蛋白标准工作液时建议10倍梯度稀释,不要一次稀释50倍,以免产生较大误差。

  • 为保证蛋白的精que定量,样品的提取和蛋白标准品的稀释配制比较好选用相同的缓冲液,同保证两者检测条件一致。如果缓冲液本身就有较高的背景值,建议使用其他的方法测定。

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