HPLC液相色谱柱按分离机制可分为分配柱和吸附柱等,它们的区别主要在于固定相。 分配柱:一般是将固定液(高沸点液体)涂渍在载体上,构成液体固定相,利用组分的分配系数差别而实现分离。将固定液的官能团通过化学键结合在载体表面,称为化学键合相(chemically bonded phase),不流失是其优点。 吸附柱:将吸附剂装入色谱柱而构成,利用组分的吸附系数的差别而实现分离。除吸附剂外,固体固定相还包括分子筛与高分子多孔小球等。
HPLC液相色谱柱老化的原则有: 1.设置老化温度时,决不允许超过固定液的zui高使用温度。 2.根据涂渍固定液的百分数合理设置老化温度,低含量固定液的柱子,老化温度相对要低些。3.老化时间与所用检测器的灵敏度和类型有关,灵敏度越高,要求老化的时间相对越长。 4.老化时间的长短也取决于固定液的特性,“气相色谱纯的”要少于“工业纯的”。例如,OV固定液老化时间要少于SE-60,QF-1(工业纯)。 5.样品的极性越强,要求填充柱老化的时间相对越长。
HPLC液相色谱柱老化原因:因为新色谱或者很久不使用的色谱内会有一些不干净的杂质,提高温度到不超过色谱本身zui髙极限温度进行老化就可以使色谱图中的噪音减小。还有一种分子筛填充柱,新柱子或放置很长时间未用,在使用前需在通载气的状态下使用300℃老化2小时左右,才能使用。
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