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向融化并冷至40℃-45℃的培养基中接入试验菌悬液（1%），混匀，使培养基含菌浓度为5105 CFU/mL～5106 CFU/mL，倾注到平皿内，每皿约15mL-20 mL，转动平皿，使菌液与培养基混匀，静置凝固。
盖好平皿，置37℃培养箱，培养16h～18h观察结果。用游标卡尺测量抑菌环的直径并记录。测量抑菌环时，应选均匀而完全无菌生长的抑菌环进行测量，其直径应以抑菌环外沿为界。
将培养18～24小时的新鲜斜面培养物用PBS洗下，利用比浊法稀释至所需使用的浓度，4℃备用。
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